青鏈霉素混合液又稱雙抗，是專門用于細(xì)胞培養(yǎng)的,可以直接添加到細(xì)胞培養(yǎng)液內(nèi)。青霉素-鏈霉素溶液(100X)中，青霉素的含量為10000U/ml，鏈霉素的含量為10mg/ml。在細(xì)胞培養(yǎng)液中推薦的青霉素的工作濃度為100U/ml，鏈霉素的工作濃度為0.1mg/ml。雙抗起的作用為抗生素、抑制細(xì)菌生長(zhǎng)、避免細(xì)胞污染。
青鏈霉素混合液的制備
用20mL空針抽16毫升三蒸水(或PBS)，溶160萬(wàn)單位/瓶的青霉素G鈉一支，過(guò)濾除菌；用10mL空針抽10毫升三蒸水(或PBS)，溶一支100萬(wàn)單位/瓶的硫酸鏈霉素一支，過(guò)濾除菌。分裝EP管中，-20度保存。使用前每100m培養(yǎng)液加雙抗各100ul-150u即可。細(xì)胞培養(yǎng)液雙抗?jié)舛龋呵嗝顾谿鈉，100-1000U/ml；硫酸鏈霉素，100-1000μg/ml(100萬(wàn)單位=1g)。
試驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題
1、細(xì)胞培養(yǎng)中加的雙抗的濃度是多少？
一般細(xì)胞培養(yǎng)都是買的雙抗儲(chǔ)存液吧,上面會(huì)寫(xiě)著X100 就是稀釋100倍加入培養(yǎng)液?jiǎn)h,比如500ml培養(yǎng)液,加50mlFBS,5ml雙抗
.2、細(xì)胞培養(yǎng)中加的雙抗有什么作用？
抗生素:常用的是青鏈霉素，俗稱“雙抗溶液”。青霉素主要是對(duì)革蘭陽(yáng)性菌有效，鏈霉素主要對(duì)格蘭陰性菌有效。加入這兩種抗生素可預(yù)防絕大多數(shù)細(xì)菌污染。雙抗對(duì)細(xì)菌有用，加入培養(yǎng)基一周有效，之后失活，起到一點(diǎn)預(yù)防細(xì)菌污染的作用，如果培養(yǎng)條件好，可以不加。建議藥物實(shí)驗(yàn)不加雙抗，因?yàn)樗鼘?duì)細(xì)胞形態(tài)、代謝還是有一點(diǎn)影響。
青鏈霉素混合液為索萊寶常備貨產(chǎn)品，貨號(hào)為P1400。索萊寶所售青鏈霉素混合液(100X) (Penicillin-Streptomycin Solution, 100X)用于預(yù)防細(xì)胞培養(yǎng)的細(xì)菌污染，特別是革蘭氏陽(yáng)性和陰性細(xì)菌的污染。產(chǎn)品經(jīng)過(guò)濾除菌處理，可以直接添加到細(xì)胞培養(yǎng)液內(nèi)。
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