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                產(chǎn)品名稱:Cell counting KIT-8 (CCK-8)

                產(chǎn)品型號:CK04

                產(chǎn)品報價:

                產(chǎn)品特點:Cell counting KIT-8 (CCK-8)日本同仁原裝為MTT法的替代方法,是一種基于WST(水溶性四唑鹽,化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的廣泛應(yīng)用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。可用于藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏等試驗

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                CK04Cell counting KIT-8 (CCK-8)的詳細資料:

                Cell counting KIT-8 (CCK-8)

                產(chǎn)品簡介:
                Cell counting KIT-8 (CCK-8)簡稱CCK-8 試劑盒,為MTT 法的替代方法,是一種基于WST(水溶性四唑鹽,化學(xué)
                名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的廣泛應(yīng)用于細胞增殖和細胞毒性的
                快速高靈敏度檢測試劑盒。CCK-8 試劑盒可用于藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏等試驗

                Cell counting KIT-8 (CCK-8)使用說明:
                一、制作標準曲線(測定細胞具體數(shù)量時)
                1、先用細胞計數(shù)板計數(shù)所制備的細胞懸液中的細胞數(shù)量,然后接種細胞。
                2、按比例依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個細胞濃度梯度,一般要做3-5 個細胞濃度梯度,每組3-6 個復(fù)孔。
                3、接種后培養(yǎng)細胞貼壁,然后加CCK-8 試劑培養(yǎng)一定時間后測定OD 值,制作出一條以細胞數(shù)量為橫
                坐標(X 軸),OD 值為縱坐標(Y 軸)的標準曲線。根據(jù)此標準曲線可以測定出未知樣品的細胞數(shù)量(試用
                此標準曲線的前提是實驗的條件要*,便于確定細胞的接種數(shù)量以及加入CCK-8 后的培養(yǎng)時間。)
                二、細胞活性檢測
                1、在96 孔板中接種細胞懸液(100μL/孔)。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)(在37℃,5% CO2 的條件下)。
                2、向每孔加入10μL CCK-8 溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響OD 值的讀數(shù))。
                3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4 小時。
                4、用酶標儀測定在450nm 處的吸光度。
                5、如果暫時不測定OD 值,打算以后測定的話,可以向每孔中加入10μL 0.1M 的HCl 或者1%SDS(W/V)
                溶液,并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在24 小時內(nèi)吸光度不會發(fā)生變化。
                三、細胞增值-毒性檢測
                1、在96 孔板中配置100 μL 的細胞懸液。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)24 小時(在37 ℃,5% CO2 的條件下)。
                2、向培養(yǎng)板加入10μL 不同濃度的待測物質(zhì)。在培養(yǎng)箱孵育一段適當?shù)臅r間(例如:6、12、24 或48 小時)。
                3、向每孔加入10 μL CCK-8 溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響OD 值的讀數(shù))。如果待測物質(zhì)
                有氧化性或還原性的話,可在加CCK-8 之前更換新鮮培養(yǎng)基(除去培養(yǎng)基,并用培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加
                入新的培養(yǎng)基),去掉藥物影響。
                4、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4 小時。
                5、用酶標儀測定在450 nm 處的吸光度。
                6、如果暫時不測定OD 值,打算以后測定的話,可以向每孔中加入10μL 0.1M 的HCl 或者1%SDS(W/V)
                溶液,并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在24 小時內(nèi)吸光度不會發(fā)生變化

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