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改良Harris蘇木素染色液

改良 Harris 蘇木素染色液
貨號: G1150
規(guī)格:100ml/500ml

產(chǎn)品說明：
蘇木素為堿性天然染料，可使細胞核著色。細胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是 DNA，在 DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使 DNA 雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色。

操作步驟（僅供參考）：
（一） 石蠟切片染色
1、 切片脫蠟水
① 二甲苯作用 2 次， 每次 5～10min。
②（可選）無水乙醇作用 2 次， 每次 3～5min。
③ 95%的乙醇 3～5min
④ 90%的乙醇 3～5min
⑤ 80%的乙醇 3～5min
⑥ 自來水或蒸餾水沖洗 1～3min
2、染色
①改良 Harris 蘇木素染色液 5～8min
②自來水或蒸餾水沖洗 5～10s
③（可選）1%鹽酸乙醇分化 2～5s
④自來水沖洗 20～30s
⑤（可選）弱堿性水返藍 20～40s
⑥自來水沖洗 30～60s
⑦伊紅染色 3～5min
⑧自來水沖洗 1～5s
3、脫水、透明、封固
①80%乙醇 10～20s
②90%乙醇 10～20s
③95%乙醇作用 2 次， 每次 1～2min。
④無水乙醇作用 2 次， 每次 2～3min。
⑤二甲苯透明 3 次， 每次 2～3min。
⑥中性樹脂封片。

染色結(jié)果：
細胞核呈藍色；細胞質(zhì)、肌纖維、膠原纖維、甲狀腺膠質(zhì)等呈深淺不一的紅色；角蛋白、紅細胞等呈明亮的橙紅色。
（二） 冰凍切片染色
1、乙mi-乙醇混合固定液 5～10s
2、自來水沖洗 2～5s
3、改良蘇木素染色液滴染 1～2min(可加熱 50℃)。
4、自來水沖洗 2～5s
5、（可選）1%的鹽酸乙醇分化液2～5s
6、自來水沖洗 2～5s
7、（可選）弱堿性水返藍 2～5s
8、自來水沖洗 5～10s
9、伊紅染色液染色 2～5s
10、水洗 1～2s
11、80%的乙醇 1～2s
12 、95%的乙醇 1～2s
13、無水乙醇 2～5s
14、苯酚二甲苯（1:3） 2～5s
15、二甲苯透明 3 次， 每次 2～5s。
16、中性樹脂封片

染色結(jié)果：
細胞核呈藍色；細胞質(zhì)、纖維呈紅色。
（三） 細胞染色
1、4%的多聚甲醛固定 10～20min。
2、自來水沖洗 2 次， 每次 2min。
3、蒸餾水沖洗 2 次， 每次 2min。
4、染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟，作用時間應(yīng)相應(yīng)縮短。

染色結(jié)果：
細胞核呈藍色；細胞質(zhì)、纖維呈紅色。

注意事項：
1、切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。
2、乙醇應(yīng)經(jīng)常更換新液。
3、鹽酸乙醇分化液的分化時間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄、組織的類別和鹽酸乙醇分化液的新舊而定，另外分化后自來水沖洗時間應(yīng)該足夠，以便*清洗酸。
4、乙mi-乙醇混合固定液是由乙mi和 95%乙醇等量混合而得，再加入適量乙酸，密閉保存。
5、冷凍切片染色時間盡量要短。
6、促藍液常使用 0.2～1%氨水水溶液或 Scoot 促藍液或 0.1～1%碳酸鋰水溶液。
7、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

相關(guān)文獻：

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改良Harris蘇木素染色液