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                產(chǎn)品名稱:E010100 TS-UNG 溫度敏感型UNG酶

                產(chǎn)品型號:

                產(chǎn)品報(bào)價(jià):

                產(chǎn)品特點(diǎn):E010100 TS-UNG 溫度敏感型UNG酶
                產(chǎn)品介紹
                TS-UNG酶基因來源于低溫微生物,經(jīng)大腸桿菌重組表達(dá)獲得的新型溫度敏感型UNG酶。該酶與常規(guī)UNG酶相同,能夠催化含尿嘧啶的單鏈和雙鏈DNA釋放游離尿嘧啶,對RNA無活性,主要應(yīng)用于PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的防污染。

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                E010100 TS-UNG 溫度敏感型UNG酶的詳細(xì)資料:

                E010100  TS-UNG 溫度敏感型UNG酶 

                產(chǎn)品介紹: 

                TS-UNG酶基因來源于低溫微生物,經(jīng)大腸桿菌重組表達(dá)獲得的新型溫度敏感型UNG酶。該酶與常規(guī)UNG酶相同,能夠催化含尿嘧啶的單鏈和雙鏈DNA釋放游離尿嘧啶,對RNA無活性,主要應(yīng)用于PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的防污染。TS-UNG酶與常規(guī)UNG酶相比,對溫度敏感、易于滅活,從而避免了常規(guī)UNG酶滅活后殘留活性對熒光PCR靈敏度及擴(kuò)增產(chǎn)物的降解作用。

                TS-UNG酶可以在25℃~50℃范圍內(nèi)使用在37℃左右具有大反應(yīng)活性。建議在37℃,10min消化含dUTP模板,在50℃,10min或95℃,2min進(jìn)行滅活。利用TS-UNG酶低溫消化、低溫滅活的特性,TS-UNG酶可以用于RT-PCR防止擴(kuò)增污染。

                活性定義:
                37℃條件下,1小時(shí)降解1μg含dU堿基的單鏈DNA的酶量為1單位。

                規(guī)格:1U/μl

                儲存緩沖液:
                20 mM Tris-HCl,pH 7.5(25℃),100 mM NaCl,0.1 mM EDTA,1 mM DTT,0.1% Triton X-100,50% glycerol. 

                保存條件:
                保存于-20℃。并避免保存時(shí)反復(fù)凍融。

                反應(yīng)條件:

                1、反應(yīng)體系:


                Component

                Volume per

                Reactionμl

                Concentration in Master Mix

                Template

                *

                < 1μg/reaction

                Primer 1

                1~5

                0.2~1.0μM

                Primer 2

                1~5

                0.2~1.0μM

                d NTPs

                (replace dTTP for 200μM~600μM dUTP) 

                1

                200μM(dATP、dGTP、dCTP)

                10×PCR Buffer

                5

                25mM MgCl2

                2~8

                1.0~4.0mM

                 Taq5U/μl

                0.25

                1.25U

                TS-UNG(1U/μl

                0.2~0.5

                0.2~0.5U

                H2O

                *

                ——

                Total volume

                50μl


                2、Incubate the product for 10min at 37℃;

                3、Inactivate TS-UNG by heating to 50℃ for 10min,or 95℃ for 2min;

                質(zhì)量控制:

                1、SDS-PAGE電泳純度大于98%;

                2、無核酸外切酶和核酸內(nèi)切酶活性、RNase酶活性;

                注意事項(xiàng):
                1、由于不同目的基因堿基組成不同,因此對TS-UNG酶的敏感度也不同,建議根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果,在0.2~0.5U之間選擇TS-UNG適合用量。

                2、避免多次凍融,切勿暴露在溫度波動較大之處。溫度波動對產(chǎn)品的穩(wěn)定性有極大影響。3、TS-UNG酶可以在PCR反應(yīng)前清除不慎污染的U-DNA分子。為有效防止污染,一個(gè)實(shí)驗(yàn)室必須在所有的PCR反應(yīng)中均使用dUTP作為dNTPs組分之一進(jìn)行擴(kuò)增,使所有擴(kuò)增產(chǎn)物都成為U-DNA。 

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