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                產(chǎn)品名稱:如何選購(gòu)超低分子量蛋白maker

                產(chǎn)品型號(hào):PR1300

                產(chǎn)品報(bào)價(jià):

                產(chǎn)品特點(diǎn):如何選購(gòu)超低分子量蛋白maker
                貨號(hào) : PR1300
                規(guī)格 : 15T (150 µ1)
                保存 : -20℃保存,有效期為一年。

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                PR1300如何選購(gòu)超低分子量蛋白maker的詳細(xì)資料:

                如何選購(gòu)超低分子量蛋白maker
                貨號(hào) : PR1300
                規(guī)格 : 15T (150 µ1)
                保存 : -20℃保存,有效期為一年。


                產(chǎn)品簡(jiǎn)介: 
                    本產(chǎn)品包含3種多肽和2種低分子量蛋白質(zhì)組成, 分子量范圍為3. 3kD-20. 1kD。 可以用來判斷SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。本品為蛋白質(zhì)和多肽混合物的凍干粉,每種蛋白含量約為15-22.5ug,配有一支1×上樣緩沖液。


                使用說明:
                    1. 開封后,溶于150 µ1 1×上樣緩沖液,于95℃水浴5分鐘,可根據(jù)需要進(jìn)行小量分裝,每管10 µl,-20℃貯存,每次取一管使用,避免反復(fù)凍融。
                    2. 使用前取分裝后的小管室溫融化后,95℃預(yù)熱5分鐘即可上樣電泳, 用考馬斯亮藍(lán)G-250染色后可見5條蛋白帶(見下示意圖) 。


                 

                凝膠的配置方法: 

                分離膠分離膠分離膠分離膠夾層膠濃縮膠
                 20%/4.5ml16.5%/4.5ml15.5%/4.5ml10%/2ml4%/2ml
                49.5%T 3%C 0.407ml0.160ml
                49.5%T 6%C 1.82ml1.50ml1.395ml
                凝膠緩沖液1.50ml1.50ml1.50ml0.667ml0.496ml
                甘油0.48ml0.48ml0.48ml //
                ddH 2 O0.70ml1.02ml1.125ml0.926ml1.344ml
                10%APS 40µl40µl40µl20µ|20µ|
                TEMED5µl5µl5µl3µl 3µl 


                凝膠制備及染色注意事項(xiàng): 
                    1. 先配制分離膠,聚合后再配制夾層膠,后配制濃縮膠,3種膠的制膠體積比為4:1.5:1。電泳時(shí),30v跑1-2小時(shí)后,待指示前沿到達(dá)分離膠上沿時(shí),把電壓調(diào)100v,電泳結(jié)束,整個(gè)電泳過程大約需要6-8小時(shí)。
                    2. 由于多肽所含的氨基酸數(shù)目較少,因此如該多肽含有過多的極性氨基酸(堿性或酸性),則會(huì)影響其在SDS-PAGE 圖上的條帶遷移率,即其表觀分子量可能和多肽的氨基酸理論推算分子量有一定距離。
                    3. 由于 SDS-PAGE 的圖譜上,蛋白質(zhì)對(duì)數(shù)分子量和遷移率成正比直線關(guān)系的分子量范圍為 15,000-200,000因此對(duì)于分子量小于 10000 的蛋白質(zhì)或多肽的分子量,只能根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)分子量進(jìn)行估計(jì),推斷其是否落入預(yù)測(cè)的分子量范圍。
                    4. 由于超低分子量多肽(3000 及 3000 以下) ,極易從凝膠上浸出,因此染色及脫色時(shí)間不宜太長(zhǎng),脫色后凝膠也不宜在水中浸泡保存過久,否則條帶會(huì)消失。
                    5. 電泳之后可將膠置于固定液中固定20分鐘,再進(jìn)行染色,能得到較好的蛋白條帶;如時(shí)間不允許,也可不進(jìn)行固定直接染色。 如果使用配方7進(jìn)行染色時(shí)效果不好或考慮其毒性, 請(qǐng)選擇本公司的考馬斯亮藍(lán)蛋白膠快速染色液(貨號(hào):P1300),該產(chǎn)品具有染色快,無毒,靈敏性高等特點(diǎn),是常規(guī)染色液的替代品。


                相關(guān)產(chǎn)品 :

                P1015 4× 蛋白上樣緩沖液(含 DTT )
                P1016 4× 蛋白上樣緩沖液(含 β- 巰基乙醇)
                A1030 10% 過硫酸氨
                T1070 5×Tris- 甘氨酸電泳緩沖液
                P1300-500  考馬斯亮藍(lán)快速染色


                附: 小分子蛋白質(zhì)SDS-PAGE 電泳試劑配制
                1. 49.5% T 3 % C (配制夾層膠和濃縮膠)
                丙烯酰胺 48g
                甲叉雙丙烯酰胺 1.5g
                用ddH 2 0溶解后定容100ml
                2. 49. 5 % T 6 % C (配制分離膠)
                丙烯酰胺 46. 5g
                甲叉雙丙烯酰胺 3. 0g
                用ddH 2 0溶解后定容100ml
                3. 凝膠緩沖液
                Tris堿 182g
                ddH 2 0 300ml
                用HCl調(diào)節(jié)pH值8.45
                用ddH 2 0定容 500ml
                再加入SDS 1.5g
                4 . 10×陽極緩沖液(下槽緩沖液〕
                Tris堿 121. 1 g
                ddH 2 0 400ml
                用HCl調(diào)pH值8.9
                用ddH 2 0定容 500ml
                5. 陰極緩沖液(上槽緩沖液)
                Tris堿 12 .11g
                Tricine 17.92g
                SDS 1g
                用ddH 2 0定容1000ml
                此溶液不用調(diào)節(jié)pH值
                6. 固定液
                0.5% 戊二醛
                30% 乙醇
                用ddH 2 0定容100ml
                7. 染色液
                50% 甲醇
                10% 乙酸
                0.2% 考馬斯亮藍(lán)G-250
                用ddH 2 0定容500ml

                 

                如何選購(gòu)超低分子量蛋白maker

                 相關(guān)同類產(chǎn)品:

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