Trans-這個詞根有轉(zhuǎn)移、轉(zhuǎn)運、穿過等意思，well有小室的意思，可以從字面上理解，這是一類有通透性的杯狀的裝置，根據(jù)Corning公司的Transwell說明書中的介紹，可以認為這是一種膜濾器（Membrane filters），也可認為是一種有通透性的支架（permeable supports）。[1] 更準確地說，Transwell應(yīng)該是一種實驗技術(shù)，這項技術(shù)的主要材料是Transwell小室（Transwell chamber，Transwell insert），其外形為一個可放置在孔板里的小杯子，不同廠家對Transwell會有不同的命名，而不同型號也可有不同形狀，不同大小，根據(jù)實驗需要，可有不同選擇。但無論是何種外形，其關(guān)鍵部分都是*的，那就是杯子底層的一張有通透性的膜，而杯子其余部分的材料與普通的孔板是一樣。這層膜帶有微孔，孔徑大小有0.1－12.0µm，根據(jù)不同需要可用不同材料，一般常用的是聚碳酸酯膜（polycarbonate membrane）。 將Transwell小室放入培養(yǎng)板中，小室內(nèi)稱上室，培養(yǎng)板內(nèi)稱下室，上室內(nèi)盛裝上層培養(yǎng)液，下室內(nèi)盛裝下層培養(yǎng)液，上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔。我們將細胞種在上室內(nèi)，由于聚碳酸酯膜有通透性，下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細胞，從而可以研究下層培養(yǎng)液中的成分對細胞生長、運動等的影響。 應(yīng)用不同孔徑和經(jīng)過不同處理的聚碳酸酯膜，就可以進行共培養(yǎng)、細胞趨化、細胞遷移、細胞侵襲等多種方面的研究。當然不同細胞其體積不同，具體選擇時要考慮到細胞大小。 （1）共培養(yǎng)體系：小于3.0um孔徑條件下，細胞不會遷徙通過，因此，若研究不涉及細胞運動能力，不需要細胞穿過聚碳酸酯膜，則應(yīng)選擇3.0µm以下孔徑。常用0.4、3.0µm。常用的是0.4µm。將細胞A種于上室，細胞B種于下室，可以研究細胞B分泌或代謝產(chǎn)生的物質(zhì)對細胞A的影響。 （2）趨化性實驗：可用5.0、8.0、12.0µm膜，上室細胞可穿過聚碳酸酯膜進入下室，計數(shù)進入下室的細胞量可反映下室成分對上室細胞的趨化能力。①細胞B對細胞A的趨化作用：將細胞A種于上室，細胞B種于下室，可以研究細胞B分泌或代謝產(chǎn)生的物質(zhì)對細胞A的趨化作用。②趨化因子對細胞的趨化作用：將細胞種于上室，下室加入某種趨化因子，可研究該趨化因子對細胞的趨化作用。 （3）腫瘤細胞遷移實驗：常用8.0、12.0µm膜，上室種腫瘤細胞，下室加入FBS或某些特定的趨化因子，腫瘤細胞會向營養(yǎng)成分高的下室跑，計數(shù)進入下室的細胞量可反映腫瘤細胞的遷移能力。 （4）腫瘤細胞侵襲實驗常用8.0、12.0µm膜，原理與腫瘤細胞遷移實驗類似。 |
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