DEAE-Sephadex A-50 柱層析純化免疫球蛋白原理 DEAE-sephadexA-50 柱層析是離子交換層析的一種。 (四) 注意事項(xiàng) 1.柱的選擇:從理論上說,只要柱足夠長,就得獲得理想的分辨率,但由于層析柱流速同壓力梯度有關(guān),柱長增加使流速減慢,峰變寬,分辨率降低。柱的直徑增加,使液體流動的不均勻性增加,分辨率明顯下降。 2.純化過程必須嚴(yán)格控制脫緩沖液的PH及離子強(qiáng)度。樣品與A-50凝膠必須用洗脫緩沖液*平衡后,才能進(jìn)行柱層析。 3.所裝的柱床必須表面平整,無溝流及氣泡,否則應(yīng)重裝。 4.洗脫過程中應(yīng)嚴(yán)格控制流速,且勿過快。 5.上樣的體積要小,濃度不宜過高。 6.加樣及整個洗脫過程中,嚴(yán)防柱面變干。 |